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博茵生物可为您提供从基因合成(免费的密码子优化,mRNA二级结构优化)到蛋白表达、纯化、复性等一体化定制服务。我们拥有成熟的原核表达和真核表达技术平台,项目负责人员具有丰富的理论和实践经验,对于原核表达系统中难以表达的蛋白和表达蛋白不溶等难题,通过对表达体系进行优化,如表达载体与表达菌株相容性的测试、诱导表达条件的优化、复性等,都能得对很好的解决。在真核表达方面亦有自己的优势,可根据毕赤酵母等菌株的密码子偏爱性,免费提供给您最佳高级密码子优化,利用毕赤酵母使表达的蛋白糖基化,表达的蛋白在体外诊断中具有很强的适应性。
次序 |
主要内容 |
目标 |
周期 |
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原核 |
真核 |
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1 |
基因合成 |
靶基因序列设计,密码子优化 |
2-3周 |
2周 |
2 |
亚克隆 |
测序验证构建质粒的准确性 |
2-3周 |
2周 |
3 |
表达优化及评估 |
通过PCR和SDS-PAGE双重验证 |
1-2周 |
3-5周 |
4 |
蛋白表达与纯化 |
SDS-PAGE、WB等方法验证目标蛋白 |
1-2周 |
2周 |
注1:原核重组蛋白可选择的表达载体以pET和pGEX系列为主,可选择的宿主菌BL21 (DE3)、Rosetta (DE3)。
注2:可选择的表达载体以pPIC9K、pPIC9和pPICZ-A系列为主。
客户提供:
目标蛋白的基因序列或者氨基酸序列
最终交付:
(1) 目的基因的重组表达质粒
(2) 含重组质粒的表达菌株
(3)纯化后的目标蛋白5mg(纯度90%以上)
(4)测序、电泳等检测报告
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